致痙攣性殺鼠劑主要包括氟乙酰胺、氟乙酸鈉、甘氟、毒鼠強(qiáng)、殺鼠硅（毒鼠硅）。急性致痙攣性殺鼠劑中毒是短期內(nèi)接觸致痙攣性殺鼠劑后引起的以**神經(jīng)系統(tǒng)損害為主的全身性**。
1 概述
致痙攣性殺鼠劑多數(shù)為白色粉末或結(jié)晶，但不同毒物在水和有機(jī)溶劑中的溶解度差異很大，化學(xué)性質(zhì)大多較為穩(wěn)定，大部分有造成二次中毒的危險(xiǎn)。致痙攣性殺鼠劑均為高毒或劇毒化學(xué)物，對(duì)大鼠的經(jīng)口LD50大多小于 5mg/kg（附件 1）。致痙攣性殺鼠劑中毒途徑主要為經(jīng)口攝入，絕大多數(shù)為食源性中毒，如食用致痙攣性殺鼠劑污染的食品和飲用水。
2 中毒事件的調(diào)查和處理
2.1 現(xiàn)場(chǎng)處置人員的個(gè)體防護(hù)
現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查人員進(jìn)入殺鼠劑生產(chǎn)、儲(chǔ)存現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查時(shí)，應(yīng)佩戴防顆粒物口罩，乳膠或化學(xué)防護(hù)手套和防護(hù)眼罩，防護(hù)服無特殊要求。進(jìn)行食品加工、儲(chǔ)存現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查時(shí)，應(yīng)佩戴乳膠或化學(xué)防護(hù)手套，防護(hù)服無特殊要求。
現(xiàn)場(chǎng)采樣人員采集食品樣品時(shí)，應(yīng)佩戴防顆粒物口罩，乳膠或化學(xué)防護(hù)手套和防護(hù)眼罩，防護(hù)服無特殊要求。醫(yī)療救護(hù)人員在救護(hù)中毒病人時(shí)，一般不必穿戴防護(hù)裝備。
2.2 中毒事件的調(diào)查
調(diào)查人員到達(dá)中毒現(xiàn)場(chǎng)后，應(yīng)先了解中毒事件的概況，然后進(jìn)行中毒事件相關(guān)場(chǎng)所、人員等調(diào)查工作，并及時(shí)向中毒事件指揮部提出收集并封存所有可疑中毒食品、其他可能導(dǎo)致本次中毒事件物品以及中毒病人嘔吐物、血液、尿液和其他救治病人的醫(yī)療廢棄物的建議。
2.2.1 中毒事件相關(guān)場(chǎng)所的調(diào)查
生活性中毒事件的調(diào)查對(duì)象包括中毒事件涉及的食品生產(chǎn)、加工至食用整個(gè)過程的各個(gè)場(chǎng)所，調(diào)查內(nèi)容包括食品加工過程（包括使用的原料和配料、調(diào)料、食品容器、使用的工具），食品的分裝、儲(chǔ)存的條件等。生產(chǎn)性中毒事件的調(diào)查對(duì)象主要為生產(chǎn)、儲(chǔ)存場(chǎng)所，調(diào)查內(nèi)容包括生產(chǎn)工藝流程、環(huán)境狀況、通風(fēng)措施、防護(hù)條件、人員接觸情況等。
2.2.2 中毒事件相關(guān)人員的調(diào)查
調(diào)查對(duì)象應(yīng)包括中毒病人、目擊證人以及其他相關(guān)人員（如飯店負(fù)責(zé)人、廚師、服務(wù)員、食品采購員、同工作場(chǎng)所工人等）。調(diào)查內(nèi)容包括接觸時(shí)間、接觸物質(zhì)、接觸人數(shù)、中毒人數(shù)、中毒的主要癥狀、中毒事件的進(jìn)展情況、已經(jīng)采取的緊急措施、飲食的加工方法、食品的來源等。同時(shí)，還應(yīng)向臨床救治單位進(jìn)一步了解相關(guān)資料（如搶救過程、臨床**資料、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果等）。
2.2.3 現(xiàn)場(chǎng)周圍環(huán)境和生活習(xí)慣的調(diào)查
如某一地區(qū)反復(fù)出現(xiàn)此類事件，則調(diào)查內(nèi)容還應(yīng)包括現(xiàn)場(chǎng)周圍是否同時(shí)有動(dòng)物大量死亡，動(dòng)物死前的癥狀表現(xiàn)，現(xiàn)場(chǎng)周圍鼠藥使用情況（包括鼠藥的種類、投放時(shí)間和數(shù)量、儲(chǔ)存等），居民的生產(chǎn)、生活習(xí)慣（如飲水、飲食等）。對(duì)現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查的資料作好記錄，進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)拍照、錄音等。取證材料要有被調(diào)查人的簽字。
2.3 現(xiàn)場(chǎng)中毒樣品的快速檢測(cè)
中毒事件現(xiàn)場(chǎng)采集的可疑中毒食品、水、毒餌、鼠藥以及中毒病人的嘔吐物等樣品可在現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行快速定性檢測(cè)?？紤]毒鼠強(qiáng)中毒時(shí)，
可使用硫酸-變色酸目視比色法定性測(cè)定（附件 2），有條件可使用硫酸-變色酸分光光度比色法定量測(cè)定（附件 3）；考慮氟乙酰胺中毒時(shí)，可使用改良奈氏試劑法（附件 4）或異羥肟酸鐵反應(yīng)法（附件 5）測(cè)定。
2.4中毒事件的確認(rèn)和鑒別
2.4.1 中毒事件的確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)
同時(shí)具有以下三點(diǎn)，可確認(rèn)為急性致痙攣性殺鼠劑中毒事件：
a)中毒病人有致痙攣性殺鼠劑接觸機(jī)會(huì)；
b)中毒病人短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)以癲癇樣大發(fā)作等**神經(jīng)系統(tǒng)興奮為主的臨床表現(xiàn)；
c)血、嘔吐物和食物等樣品中檢出致痙攣性殺鼠劑。
2.4.2 中毒事件的鑒別
應(yīng)注意與乙型腦炎、流行性腦脊髓膜炎等傳染病疫情、群體性癔病以及其它毒物中毒事件（如霉變甘蔗中毒、有機(jī)氯殺蟲劑中毒等）鑒別。
2.5現(xiàn)場(chǎng)醫(yī)療救援
現(xiàn)場(chǎng)醫(yī)療救援首要措施是迅速控制中毒病人的抽搐發(fā)作，并保持呼吸道通暢。意識(shí)清晰的中毒病人應(yīng)立即進(jìn)行催吐，有條件可給予活性炭（**用量為 50g，兒童用量為 1g/kg）口服。當(dāng)出現(xiàn)大批中毒病人，應(yīng)首**行現(xiàn)場(chǎng)檢傷分類，優(yōu)先處理紅標(biāo)病人。
2.5.1 現(xiàn)場(chǎng)檢傷分類
a)紅標(biāo)，具有下列指標(biāo)之一者：昏迷；持續(xù)抽搐；窒息。
b)黃標(biāo)，具有下列指標(biāo)者：抽搐。
c)綠標(biāo)，具有下列指標(biāo)者：
出現(xiàn)**、頭暈、乏力、惡心、嘔吐等癥狀。
d)黑標(biāo)，同時(shí)具備下列指標(biāo)者：
意識(shí)喪失，瞳孔散大，無自主呼吸，大動(dòng)脈搏動(dòng)消失。
2.5.2 現(xiàn)場(chǎng)醫(yī)療救援
對(duì)于紅標(biāo)病人要保持復(fù)蘇體位，立即建立靜脈通道，抽搐發(fā)作者，立即緩慢靜脈注射***或****，必要時(shí)可聯(lián)合應(yīng)用****鈉。黃標(biāo)病人應(yīng)密切觀察病情變化。出現(xiàn)呼吸節(jié)律明顯不規(guī)律、窒息或嚴(yán)重缺氧等情況時(shí)，及時(shí)采取對(duì)癥支持措施。綠標(biāo)病人脫離環(huán)境后，暫不予特殊處理，觀察病情變化。
2.5.3 病人轉(zhuǎn)送
中毒病人經(jīng)現(xiàn)場(chǎng)急救處理后，應(yīng)立即就近轉(zhuǎn)送至有血液凈化條件的醫(yī)院繼續(xù)觀察和**。
3 中毒樣品的采集與檢測(cè)
3.1 采集樣品的選擇
可能導(dǎo)致中毒的食品、中毒病人的嘔吐物、胃內(nèi)容物和血液是**樣品。另外，可根據(jù)中毒事件的現(xiàn)場(chǎng)調(diào)查結(jié)果，確定應(yīng)采集的其它樣品種類。
3.2 樣品的采集方法
嘔吐物、胃內(nèi)容物、固體食品和半流質(zhì)食品使用具塞玻璃瓶或聚
乙烯瓶密閉盛放，采樣量 50g～100g；液體樣品(血液除外)使用具塞玻璃瓶或聚乙烯瓶盛放，采樣量 300ml～500ml；血液樣品使用具塞的抗凝試管盛放，采血量應(yīng)大于 10ml。如果測(cè)定血漿中的毒鼠強(qiáng)，血液樣品采集后立即用 3000rpm/min 離心，移取上層血漿。
3.3 樣品的保存和運(yùn)輸
所有樣品采集后*好在 4℃條件下冷藏保存和運(yùn)輸，如無條件冷藏保存運(yùn)輸，樣品應(yīng)在采集后 24h 內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。所有實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)
完畢的樣品，應(yīng)在冷凍條件下保存一周，以準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)室復(fù)核。
3.4推薦的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法
a) 中毒樣品的毒鼠強(qiáng)測(cè)定可使用氣相色譜法定性及定量分析（GA/T 205-1999）。
b)血漿中毒鼠強(qiáng)可使用液液萃取/氣相色譜氮磷檢測(cè)器法定量測(cè)定（附件 6）
c)食品和生物樣品中氟乙酰胺和毒鼠強(qiáng)的同時(shí)測(cè)定可使用液液萃取/氣相色譜氮磷檢測(cè)器法定量分析（附件 7）。
4 醫(yī)院內(nèi)救治
4.1 病人交接
中毒病人送到醫(yī)院后，由接收醫(yī)院的接診醫(yī)護(hù)人員與轉(zhuǎn)送人員對(duì)中毒病人的相關(guān)信息進(jìn)行交接，并簽字確認(rèn)。
4.2 診斷和診斷分級(jí)
救治醫(yī)生對(duì)中毒病人或陪護(hù)人員進(jìn)行病史詢問，對(duì)中毒病人進(jìn)行體格檢查和實(shí)驗(yàn)室檢查，確認(rèn)中毒病人的診斷，并進(jìn)行診斷分級(jí)。
診斷分級(jí)
a) 觀察對(duì)象
有致痙攣性殺鼠劑接觸機(jī)會(huì)，而無臨床癥狀者。
b)輕度中毒：
出現(xiàn)**、頭暈、惡心、嘔吐、四肢無力等癥狀，可有局灶性癲癇樣發(fā)作；
c)中度中毒：在輕度中毒基礎(chǔ)上，具有下列之一者：
i 癲癇樣大發(fā)作；
ii 精神病樣癥狀，如幻覺、妄想等。
d) 重度中毒：在中度中毒基礎(chǔ)上，具有下列之一者：
i 癲癇持續(xù)狀態(tài)；
ii 合并其他臟器功能衰竭。
4.3**
接收醫(yī)院對(duì)所接收的中毒病人確認(rèn)診斷和進(jìn)行診斷分級(jí)后，根據(jù)病情的嚴(yán)重程度將病人送往不同科室進(jìn)行進(jìn)一步救治。觀察對(duì)象進(jìn)行至少 24h～48h 醫(yī)學(xué)觀察，輕、中度中毒病人住院**，重度中毒病人立即進(jìn)行監(jiān)護(hù)搶救**。
4.3.1 **體內(nèi)毒物
a)催吐：對(duì)于意識(shí)清晰、經(jīng)口中毒早期者，可進(jìn)行催吐。
b)洗胃：對(duì)經(jīng)口中毒不足 24h 的病人均要進(jìn)行洗胃。中、重度中毒的病人洗胃后要保留洗胃管，以備反復(fù)灌入活性炭。
c)活性炭：輕度中毒病人洗胃后給予活性炭 1 次，中、重度中毒病人可反復(fù)使用，使用劑量一般為**每次 30g～50g，兒童每次 1g/kg。
d)血液凈化：氟乙酰胺、氟乙酸鈉和甘氟中毒一般選用血液透析**，毒鼠強(qiáng)中毒需使用血液灌流進(jìn)行**。中、重度中毒病人在保證生命體征平穩(wěn)的情況下，應(yīng)早期進(jìn)行血液凈化**，可多次進(jìn)行。
4.3.2 **止痙
a) ****鈉：為基礎(chǔ)用藥，可與其他**止痙**合用。輕度中毒，每次 0.1g，每 8h1 次，肌內(nèi)注射；中、重度中毒，每次 0.1g～0.2g，每 6h～8h 時(shí) 1 次，肌內(nèi)注射。兒童每次 2mg/kg。抽搐停止后減量使用 3～7 天。
b) ***：癲癇大發(fā)作和癲癇持續(xù)狀態(tài)的****。**每次10mg～20mg，兒童每次 0.3mg/kg～0.5mg/kg，緩慢靜脈注射，注射速度**不大于 5mg/min，兒童不大于 2 mg/min。必要時(shí)可重復(fù)靜脈注射。
c) 其他：癲癇持續(xù)狀態(tài)超過 30min，連續(xù)兩次使用***，抽搐仍不能得到有效控制，應(yīng)及時(shí)使用靜脈麻醉劑。
4.3.3 特效****
乙酰胺為氟乙酰胺、氟乙酸鈉和甘氟中毒的特效**劑，需早期、
足量應(yīng)用。輕、中度中毒病人每次 2.5g～5.0g，肌內(nèi)注射，每日 2～4次，連用 5～7 日；重度中毒病人一次可給予 5.0g～10.0g。
4.3.4 其他對(duì)癥支持**
加強(qiáng)營養(yǎng)、合理膳食，注意水、電解質(zhì)及酸堿平衡，密切監(jiān)護(hù)心、腦、肝、腎等重要臟器功能，及時(shí)給予相應(yīng)的**措施。
5 應(yīng)急反應(yīng)的終止
中毒食品和其他可疑毒物已經(jīng)完全收繳和銷毀，中毒相關(guān)危險(xiǎn)因素已被有效控制，未出現(xiàn)新的中毒病人且原有病人病情穩(wěn)定 24h 以上。
附件 1:
致痙攣性殺鼠劑的理化性質(zhì)和毒性
毒性人*低致死
毒物名稱分子式物理特性化學(xué)性質(zhì)備注
CAS動(dòng)途LD50
劑量
物徑 （mg/kg）
毒鼠強(qiáng)80-12-6C4H8N4O2S2無味的白色晶體或粉末，難溶于甲化學(xué)性質(zhì)非常大經(jīng)0.1～0.35mg～10mg可引起二次中毒
醇、乙醇和水，微溶于氯仿和丙酮， 穩(wěn)定，在稀酸 鼠口
可溶于乙酸乙酯和苯，易溶于二甲或稀堿中不分
基亞砜。解。
氟乙酰胺640-19-7C2H4OFN白色針狀結(jié)晶，無臭無味，易溶于常溫下化學(xué)性大經(jīng)5.75 mg/kg可造成二次中
水、乙醇、丙酮，微溶于氯仿。空質(zhì)較為穩(wěn)定。鼠口毒。
氣中易潮解，熔點(diǎn) 107℃～108℃。
氟乙酸鈉62-74-8FCH2COONa白色晶體，略帶醋酸氣味，極易溶常溫下化學(xué)性大經(jīng)0.15 mg/kg可引起二次中毒
于水，微溶于丙酮、乙醇。在空氣質(zhì)較為穩(wěn)定， 鼠口
中易潮解成糖漿狀。但高于 200 ℃
可以分解。
毒鼠硅29025-67-0C12H16O3NClSi白色結(jié)晶或粉末，無臭、味苦，難遇酸易分解大經(jīng)1～4
溶于水，可溶于苯和氯仿等多種有鼠口
機(jī)溶劑。熔點(diǎn) 230℃～235℃。
甘氟80650-71-2C3H6OF2占無色或微黃色透明油狀液體，具有化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定大經(jīng)30可引起二次中
70%～80%，揮發(fā)性，略帶酸味，能與水、醇、鼠口毒。
C3H6OFCl占乙醚混溶。經(jīng) 66
20%～30%皮
附件 2
硫酸-變色酸定性測(cè)定食品、嘔吐物等樣品中毒鼠強(qiáng)
1 適用范圍
本方法適用于食品、水、毒餌、鼠藥、嘔吐物等樣品中毒鼠強(qiáng)的定性分析。環(huán)境樣本和生物樣本中毒鼠強(qiáng)的定性測(cè)定可作為初步判斷事件性質(zhì)的重要參考，不能作為確定事件性質(zhì)的依據(jù)。重大突發(fā)事件性質(zhì)的判定，建議采用其他分析方法加以確證。
2 原理
毒鼠強(qiáng)在強(qiáng)酸條件下加熱可分解，其分解產(chǎn)物中的甲醛在酸性條件下與變色酸發(fā)生變色反應(yīng)，通過顏色變化對(duì)毒鼠強(qiáng)進(jìn)行定性分析。
3 方法重要參數(shù)
3.1檢出限：0.5μg/5ml
3.2干擾：醛類等對(duì)其可造成假陽性干擾，酚類可降低其靈敏度。醬油、醋、有顏色的飲料等液體樣品在乙酸乙酯或苯萃取后使用少量活性炭進(jìn)行脫色處理，以防止顏色干擾。
3.4 全程測(cè)定時(shí)間：20min。
4 試劑和儀器
4.1儀器：酒精燈 1 個(gè)（電熱杯或控溫電爐）、試管若干、500ml 燒
杯 1 個(gè)、100ml 燒杯 2 個(gè)、漏斗或滴管 1 個(gè)、玻璃棒 1 個(gè)、濾紙若干。
4.2試劑：乙酸乙酯、60%濃硫酸，變色酸。
5 操作步驟
5.1 樣品前處理
由于現(xiàn)場(chǎng)所采集的樣品成分復(fù)雜，除少數(shù)樣品，例如市售鼠藥或工業(yè)原粉，可直接用本方法檢測(cè)外，其他樣品均需進(jìn)行樣品前處理以去除雜質(zhì)干擾，提高靈敏度和降低假陽性率。
5.1.1 鼠藥和工業(yè)原粉
直接取少量 0.1g～0.5g 進(jìn)行檢測(cè)。
5.1.2 固體樣品（毒餌、米、面、茶葉、鹽、嘔吐物等）
取固體樣品（顆粒大的固體需先研磨碎）1g～3g 放入燒杯中，加入乙酸乙酯（苯或丙酮亦可）5ml，玻璃棒充分?jǐn)噭?，靜置 5min，將上清液用濾紙過濾，重復(fù)上述過程一次，合并上清液至一大試管內(nèi)，將試管置于沸水浴中，使提取液完全揮發(fā)。
注意：不要將已經(jīng)揮發(fā)干的試管長時(shí)間置于沸水浴中，否則會(huì)影響回收率，出現(xiàn)假陰性。
5.1.3 液體樣品（水、酒、飲料、醬油、醋等）
取液體樣品 1ml～3ml 放入大試管中，加入乙酸乙酯 5ml，充分振蕩混勻，靜置 5min，用分液漏斗或滴管分離上清液，重復(fù)過程一次，合并上清液至大試管內(nèi)，將試管置于沸水浴中，使提取液完全揮發(fā)。醬油、醋、有顏色的飲料等液體樣品在乙酸乙酯萃取后使用少量活性炭（聚酰胺粉或硅藻土亦可）進(jìn)行脫色處理，以防止顏色干擾。
5.2 定性分析
向經(jīng)前處理后的樣品試管中加入 2%變色酸 0.2ml，加 60%硫酸5.0ml，放置 100℃水浴，反應(yīng) 5min 觀察顏色變化。同時(shí)取一干凈的空試管進(jìn)行同樣操作作為對(duì)照。
6 質(zhì)量控制
檢測(cè)時(shí)，應(yīng)同時(shí)加做陰性樣品及毒鼠強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)品。
0結(jié)果報(bào)告和解釋定性分析陽性：試管內(nèi)顏色呈現(xiàn)淡紫色至紫黑色。
陰性：試管內(nèi)顏色為淡黃色。
附件 3
硫酸-變色酸分光光度比色法定量測(cè)定食品等樣品中毒鼠強(qiáng)
1 適用范圍
本方法適用于食品、毒餌、水、嘔吐物等樣品中毒鼠強(qiáng)濃度的定量分析。環(huán)境樣本以及生物樣本中毒鼠強(qiáng)的測(cè)定可作為初步判斷事件性質(zhì)的重要參考。重大突發(fā)事件性質(zhì)的判定，建議采用其他分析方法加以確證。
2 原理
毒鼠強(qiáng)在強(qiáng)酸條件下加熱可分解，其分解產(chǎn)物中的甲醛在酸性條件下與變色酸發(fā)生變色反應(yīng)，比色定量。
3 方法重要參數(shù)
3.1線性范圍：（0.5～10）μg/5.0ml。
3.2**度（RSD）：≤10%。
3.3準(zhǔn)確度（回收率）：90%～105%。
3.4檢出限：0.5μg/5.0ml。
3.5干擾：醛類等對(duì)其可造成假陽性干擾，酚類可降低其靈敏度。
3.6全程測(cè)定時(shí)間：30min。
4 試劑和儀器
4.1.儀器：酒精燈 1 個(gè)（電熱杯或控溫電爐）、分光光度計(jì)、試管若
干、500ml 燒杯 1 個(gè)、100ml 燒杯 2 個(gè)、漏斗或滴管 1 個(gè)、玻璃棒 1
個(gè)、濾紙若干。
4.2 試劑：乙酸乙酯、60%濃硫酸，變色酸顯色劑。毒鼠強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)品從公安部門獲得。
5 操作步驟
5.1 樣品前處理
由于現(xiàn)場(chǎng)所采集的樣品成分復(fù)雜，除少數(shù)樣品，例如市售鼠藥或工業(yè)原粉，可直接用本方法檢測(cè)外，其他樣品均需進(jìn)行樣品前處理以去除雜質(zhì)干擾，提高靈敏度和降低假陽性率。
5.1.1 鼠藥和工業(yè)原粉
直接取少量 0.1g～0.5g 進(jìn)行檢測(cè)。
5.1.2 固體樣品（毒餌、米、面、茶葉、鹽、嘔吐物等）
取固體樣品（顆粒大的固體需先研磨碎）1g～3g 放入燒杯中，向燒杯中加入乙酸乙酯（苯或丙酮亦可）5ml，玻璃棒充分?jǐn)噭颍o置 5min，將上清液用濾紙過濾，重復(fù)上述過程一次，合并上清液至一大試管內(nèi)，將試管置于沸水浴中，使提取液完全揮發(fā)。
注意：不要將已經(jīng)揮發(fā)干的試管長時(shí)間置于沸水浴中，否則會(huì)影響回收率，出現(xiàn)假陰性。
5.1.3 液體樣品（水、酒、飲料、醬油、醋等）
取液體樣品 1ml～3ml 放入大試管中，加入乙酸乙酯 5ml，充分振蕩混勻，靜置 5min，用分液漏斗或滴管分離上清液，重復(fù)過程一次，合并上清液至大試管內(nèi)，將試管置于沸水浴中，使提取液完全揮發(fā)。醬油、醋、有顏色的飲料等液體樣品在乙酸乙酯萃取后使用少量活性炭（聚酰胺粉或硅藻土亦可）進(jìn)行脫色處理，以防止顏色干擾。
5.2 定量分析
5.2.1 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線吸取相當(dāng)于 0μg、0.1μg、0.2μg、0.3μg、0.4μg、0.5μg的標(biāo)準(zhǔn)物加入 2%變色酸 0.2ml，加 60%硫酸 5.0ml，放置 100℃水浴10min 后以 1cm 比色皿在 573nm 波長處比色。
5.2.2. 樣品分析
用測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列的操作條件測(cè)定樣品溶液和空白對(duì)照溶液。樣品吸光度減去空白對(duì)照吸光度后，由標(biāo)準(zhǔn)曲線得出毒鼠強(qiáng)含量。
5.2.3 計(jì)算
根據(jù)取樣量 M(g)及樣品中毒鼠強(qiáng)含量 C(μg)按下式計(jì)算樣品含量。樣品含量(μg/kg)=[C/M]×1000
6 質(zhì)量控制
檢測(cè)時(shí)，應(yīng)同時(shí)加做陰性樣品。
附件 4
改良奈氏試劑法定性測(cè)定食品、生物樣品中氟乙酰胺
1 適用范圍
適用于環(huán)境樣品及部分生物樣品(嘔吐物和胃液和胃容物)中氟乙酰胺的定性測(cè)定，測(cè)定結(jié)果可作為初步判斷事件性質(zhì)的重要參考，不能作為確定事件性質(zhì)的依據(jù)。氟乙酰胺的檢測(cè)目前無國家標(biāo)準(zhǔn)分析方法，重大突發(fā)事件性質(zhì)的判定，建議采用其他分析方法加以確證。
2 原理
氟乙酰胺水溶液遇到強(qiáng)堿性的奈氏試劑,逐漸水解出氨,與奈氏試劑作用,產(chǎn)生黃棕色沉淀。
3 方法重要參數(shù)
3.1檢出限：0.5μg。
3.2干擾：銨鹽存在假陽性干擾。
3.3全程測(cè)定時(shí)間：20min。
4 器材與試劑
4.1試劑奈氏試劑:11.5g碘化汞和8g碘化鉀溶于少量水中,溶后加水稀釋至50ml,再加入25%氫氧化鈉50ml ,靜置過夜,取上清液使用,貯于棕色瓶中。
4.2陽性對(duì)照樣品：5ml胃液中加50μg氟乙酰胺。
4.3陰性對(duì)照樣品：5ml胃液中加50μg溴鼠隆。0測(cè)定
5.1樣品處理
固體或半固體(胃內(nèi)容物、嘔吐物)樣品,可采用有機(jī)溶劑直接提取法。一般常用甲醇或乙醇浸泡,在50℃水浴上溫浸1h～2h。如用其他有機(jī)溶劑(乙酸乙酯、氯仿等)時(shí),可在提取容器中充分振搖,然后過濾,濾液置60℃水浴上蒸發(fā)至近干,用適量甲醇溶解殘?jiān)?混濁時(shí)可過濾),溶液供檢驗(yàn)用;液體樣品(飲水、菜湯、飲料),可直接用氯仿等有機(jī)溶劑提取或用透析法處理,也可采用在水浴上蒸去水分后再用甲醇浸出。
5.2測(cè)定
取處理后的樣品水溶液1ml～2ml ,加奈氏試劑1ml～2ml ,如有氟乙酰胺,在滴加試劑約0.5min，觀察顏色變化。如測(cè)定環(huán)境樣品氟乙酰胺時(shí)同時(shí)與氟乙酰胺標(biāo)準(zhǔn)和水質(zhì)等作對(duì)照。如測(cè)定胃液和胃容物中氟乙酰胺時(shí)，同時(shí)與陽性樣品和陰性樣品對(duì)照。
6 結(jié)果判定
陽性：淡黃色→黃色→亮黃色→深黃色，2min 后逐漸混濁，*后生成桔紅色沉淀。
陰性：無顏色反應(yīng)。
7 說明
7.1如有銨鹽存在，滴加試劑后立即生成桔紅色沉淀。
7.2對(duì)含量低的或含量高的樣品要用幾種檢驗(yàn)方法來確證，以避免假陽性和假陰性，同時(shí)要以氟乙酰胺標(biāo)準(zhǔn)和水質(zhì)等作對(duì)照試驗(yàn)，以便檢查操作是否準(zhǔn)確。
7.3樣品分離提取后，得到的毒物數(shù)量往往很少，而且常常又不能重復(fù)采樣，為此，在試驗(yàn)前以消耗少量的樣品進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)后，再進(jìn)行確證試驗(yàn)。
附件 5
異羥肟酸鐵反應(yīng)法定性測(cè)定食品等樣品中氟乙酰胺
1 適用范圍
本方法適用于食品、毒餌、水、嘔吐物樣品，可作為初步判斷事件性質(zhì)的重要參考，不能作為確定事件性質(zhì)的依據(jù)。氟乙酰胺的檢測(cè)目前無國家標(biāo)準(zhǔn)分析方法，重大突發(fā)事件性質(zhì)的判定，建議采用其他分析方法加以確證。
2 原理
氟乙酰胺與羥胺在堿性條件下，生成異羥肟酸，與三價(jià)鐵離子作用發(fā)生變色反應(yīng)，通過顏色變化對(duì)氟乙酰胺進(jìn)行定性。
3方法重要參數(shù)
3.1檢出限：50μg/ml。
3.2干擾：堿度過高對(duì)其可造成假陽性干擾，酸度過高可造成假陰性干擾。
3.3全程測(cè)定時(shí)間：15min。
4 試劑和儀器
4.1 儀器：酒精燈 1 個(gè)（或電熱杯 1 個(gè)）、試管若干、500ml 燒杯 1個(gè)、100ml 燒杯 2 個(gè)、漏斗或滴管 1 個(gè)、玻璃棒 1 個(gè)、濾紙若干，PH 試紙。
4.2試劑：活性炭或中性氧化鋁、氫氧化鈉溶液，鹽酸羥胺溶液、鹽酸溶液、三氯化鐵。
4.3氟乙酰胺標(biāo)準(zhǔn)品從公安部門獲得。
5 樣品前處理
由于現(xiàn)場(chǎng)所采集的樣品成分復(fù)雜，除少數(shù)樣品，例如市售鼠藥或工業(yè)原粉，可直接用本方法檢測(cè)外，其他樣品均需進(jìn)行樣品前處理來以去除雜質(zhì)干擾，提高靈敏度和降低假陽性率。
5.1 鼠藥和工業(yè)原粉
直接取少量 0.1g～0.5g 進(jìn)行檢測(cè)。
5.2固體樣品（毒餌、米、面、茶葉、鹽、嘔吐物等）
取固體樣品（顆粒大的固體需先研磨碎）2g～5g 放入 10ml 比色管中，加入三倍于樣品重的蒸餾水或純凈水，振搖后過濾，將上清液用濾紙過濾，重復(fù)上述過程一次，合并上清液至一大試管內(nèi)，將比色管置于沸水浴中，使濾液煮沸濃縮至 1ml 左右。注意：不要將已經(jīng)揮發(fā)干的試管長時(shí)間置于沸水浴中，否則會(huì)影響回收率，出現(xiàn)假陰性。
5.3液體樣品（水、酒、飲料、醬油、醋等）
取液體樣品 5ml 放入大試管中，加入等量于樣品重的蒸餾水或純凈水，充分振蕩混勻，靜置 5min，用分液漏斗或滴管分離上清液，重復(fù)過程一次，合并上清液至大試管內(nèi)，將試管置于沸水浴中，使濾液煮沸濃縮至 1ml 左右。醬油、醋、有顏色的飲料等液體樣品使用少量活性炭或中性氧化鋁進(jìn)行脫色處理，以防止顏色干擾。
6 樣品測(cè)定
取待檢液 1ml 左右于試管中，加氫氧化鈉溶液 10 滴，加鹽酸羥胺溶液 5 滴，置沸水中水浴 5min（使其充分水解成氟乙酸鈉釋放出氨）。取出放冷，加鹽酸溶液 9～10 滴（調(diào) pH 值至 3～5）后，加三氯化鐵溶液 3～10 滴（使其與氟乙酸反應(yīng)），取出觀察顏色變化。同時(shí)取一干凈的空試管進(jìn)行同樣操作作為對(duì)照。
7 結(jié)果判定
陽性：粉紅或紫紅色，尤其在滴加后的液面上更為明顯。
陰性：淺黃或黃色。
8 說明
8.1加鹽酸溶液 9 滴后要用 pH 試紙測(cè)試溶液 pH 值，若 pH 值太高(堿度過高)，加入三氯化鐵溶液時(shí)可產(chǎn)生紅棕色沉淀，影響結(jié)果判定，造成假陽性結(jié)果；若 pH 值太低(酸度過高)，加入三氯化鐵溶液后氟乙酰胺顯色不敏銳或不顯色，易造成假陰性結(jié)果。pH 值可用氫氧化鈉溶液和鹽酸溶液反向調(diào)整。
8.2空白對(duì)照試驗(yàn)，取與樣品相同（不含氟乙酰胺）的物質(zhì)與樣品同時(shí)操作，以便于觀察對(duì)比。對(duì)于嘔吐物、胃內(nèi)容物等樣品，應(yīng)加陽性對(duì)照試驗(yàn)。
8.3測(cè)定時(shí)做空白對(duì)照試驗(yàn)，陰性結(jié)果為淺黃或黃色，有些空白對(duì)照為黃棕色絮狀沉淀，靜置后上層液變成無色或僅呈淺黃色。
8.4本方法不適于血液和組織器官樣品的測(cè)定。
8.5三氯化鐵溶液放置時(shí)間長時(shí)會(huì)有少量沉淀產(chǎn)生，須搖勻后使用。組合試劑的有效期為 1 年，陽性對(duì)照試驗(yàn)無反應(yīng)時(shí)不可再用。0質(zhì)量控制檢測(cè)時(shí)，應(yīng)同時(shí)做陰性樣品及氟乙酰胺標(biāo)準(zhǔn)品。
附件 6
液液萃取/氣相色譜氮磷檢測(cè)器法定量測(cè)定血漿中毒鼠強(qiáng)
1 適用范圍
用于定量測(cè)定血漿樣品中毒鼠強(qiáng)。
2 原理
使用液液萃取對(duì)樣品前進(jìn)行前處理，然后將處理后樣品定容，并經(jīng)過毛細(xì)管柱分離，使用氮磷檢測(cè)器對(duì)其中組分毒鼠強(qiáng)進(jìn)行測(cè)定，通過毒鼠強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間以及標(biāo)準(zhǔn)曲線來進(jìn)行定性和定量檢測(cè)。
3 方法重要參數(shù)
3.1線性范圍：可對(duì)血漿中毒鼠強(qiáng)含量在 10ng/ml～500ng/ml 的樣品進(jìn)行毒鼠強(qiáng)定量測(cè)定。
3.2精密度：批內(nèi)、批間 RSD≤10%。
3.3準(zhǔn)確度（回收率）：90%～110%。
3.4檢出限：*低定量濃度為 10ng/ml。
3.5全程測(cè)定時(shí)間：120min。
4 器材與試劑
氣相色譜儀（配置氮磷檢測(cè)器）；非極性毛細(xì)管氣相色譜柱（HP-1）；振蕩儀；離心機(jī)；微量加樣器；吹氮儀毒鼠強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)；乙酸乙酯
5 操作步驟
5.1色譜條件
a) 色譜柱：HP-1 交聯(lián)石英毛細(xì)管柱 30m×0.32mm i.d.×0.25μm。
b) 溫度：進(jìn)樣口 250℃，檢測(cè)器 250℃。程序升溫：初始溫度150℃，保持 1min，以 7℃/min 的速率升溫至 250℃，保持 1min。
c) 載氣：高純氮?dú)?，柱頭壓力 35kPa，不分流進(jìn)樣，分流時(shí)間0.75min，隔墊清掃：3.6ml/min。尾吹流量：30ml/min。氫氣流量：3.3ml/min?？諝饬髁浚?6ml/min。
5.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制
稱取 100mg 毒鼠強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)，用乙酸乙酯在 100ml 容量瓶中定容，配制成 1mg/ml 的毒鼠強(qiáng)儲(chǔ)備液。用儲(chǔ)備液稀釋出 5μg/ml、2μg/ml、1μg/ml、0.5μg/ml、0.2μg/ml 和 0.1μg/ml 的標(biāo)準(zhǔn)溶液，利用此系列標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，相關(guān)系數(shù)為 0.999。
5.3樣品前處理
取出 1ml 血漿樣品放入試管中，加入 2ml 乙酸乙酯，石蠟?zāi)し饪?，振蕩混?4min（如果乳化現(xiàn)象比較嚴(yán)重，可以加入 0.5ml 的異丙醇），3000rpm 離心 4min，將上清液取出，重復(fù)上述萃取過程一次，將兩次上清液合并。合并的上清液在 40℃水浴下吹氮至近干，加入 0.1ml乙酸乙酯定容，振蕩混勻 1min。
5.4 進(jìn)樣檢測(cè)
取定容后的溶液 1μl 進(jìn)樣檢測(cè)，保留時(shí)間定性，峰面積定量。
6質(zhì)量控制
6.1空白對(duì)照樣色譜圖上沒有保留時(shí)間與毒鼠強(qiáng)相同的峰。
6.2進(jìn)待測(cè)樣品前必須進(jìn)空白樣或乙酸乙酯溶劑，以確認(rèn)進(jìn)樣針和色譜儀器系統(tǒng)未受污染。
6.3 質(zhì)控樣測(cè)得值應(yīng)在質(zhì)控樣品濃度的 90%～110%之間。
附件 7
液液萃取/氣相色譜氮磷檢測(cè)器法定量分析食品、血和尿樣品中氟乙酰胺和毒鼠強(qiáng)
1 適用范圍
用于定量測(cè)定食品、血和尿樣品中毒鼠強(qiáng)和氟乙酰胺。
2 原理
使用液液萃取對(duì)樣品前進(jìn)行前處理，然后將處理后樣品定容，并經(jīng)過毛細(xì)管柱分離，氮磷檢測(cè)器對(duì)其中組分氟乙酰胺和毒鼠強(qiáng)進(jìn)行測(cè)定，通過氟乙酰胺、毒鼠強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間以及標(biāo)準(zhǔn)曲線來進(jìn)行定性和定量檢測(cè)。
3 方法重要參數(shù)
3.1線性范圍：(5～50)μg/ml。
3.2精密度：批內(nèi)、批間 RSD≤10%。
3.3準(zhǔn)確度（回收率）：80%～90%。
3.4全程測(cè)定時(shí)間：120min。
4 器材與試劑
氣相色譜儀（配置氮磷檢測(cè)器)；非極性毛細(xì)管氣相色譜柱（HP-1）；振蕩儀；離心機(jī)；微量加樣器；吹氮儀毒鼠強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)、氟乙酰胺標(biāo)準(zhǔn)
5 操作步驟
5.1色譜條件
a) 色譜柱：HP-1 交聯(lián)石英毛細(xì)管柱 30m×0.32mm i.d.×0.25μm。
b) NPD檢測(cè)器溫度:280℃,進(jìn)樣口溫度:230℃,載氣恒流模式0.7ml/min, 空氣流量:60ml/min,氫氣:3ml/min。程序升溫:初始溫度150℃,保持2min,以10℃/min升溫至250℃,并保持5min。
5.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的配制
吸取1.0mg/ml的氟乙酰胺、毒鼠強(qiáng)標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0ml于10.0ml容量瓶中,用乙酸乙酯定容至刻度,此液氟乙酰胺、毒鼠強(qiáng)的含量分別為100μg/ml,將混合標(biāo)準(zhǔn)液逐級(jí)稀釋為5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、50μg/ml,分別取1.0μg注入氣相色譜儀測(cè)定,以保留時(shí)間定性確證。氟乙酰胺和毒鼠強(qiáng)的保留時(shí)間分別為2.36min和8.72min左右。
5.3樣品前處理
5.3.1固體(米、面、饅頭、蔬菜等)
取適量樣品(15～30)g,加無水硫酸鈉研磨呈粉末狀,置于150ml帶塞錐形瓶中,加入50ml乙酸乙酯,用超聲波清洗器提取20min或振蕩1h過濾,濾液于40℃水浴濃縮至1ml～2ml。
5.3.2 飯、菜汁、洗胃液、嘔吐物等取適量樣品(15～20)g置于錐形瓶中,加50ml 乙酸乙酯,超聲提取或振蕩,乙酸乙酯層通過無水硫酸鈉過濾,于水浴濃縮至1ml～2ml。
5.3.3 病人血清、尿液取適量樣液(血清0.50ml,尿液500μl)于具塞離心管中,加5ml乙酸乙酯,振搖提取3min,于3500rpm/min下離心分層,水相再次用5ml乙酸乙酯萃取1次,合并2次萃取的有機(jī)相,濃縮至0.5ml。吸取1.0μL進(jìn)行色譜儀分析。保留時(shí)間定性，峰面積定量。
6質(zhì)量控制
6.1空白對(duì)照樣色譜圖上沒有保留時(shí)間與氟乙酰胺和毒鼠強(qiáng)相同的峰。
6.2進(jìn)待測(cè)樣品前必須進(jìn)空白樣或乙酸乙酯溶劑，以確認(rèn)進(jìn)樣針和色譜儀器系統(tǒng)未受污染。
6.3樣品分析則在相同檢測(cè)條件下,如在相同保留時(shí)間出現(xiàn)色譜峰,
可進(jìn)一步在樣液中加入定量標(biāo)準(zhǔn)液,同一保留時(shí)間出現(xiàn)峰疊加即可判
定為陽性結(jié)果。
